مسترمیکس سایبر گرین RealTiQ
- سازگاری با انواع دستگاه ها
- پایداری ، تکرار پذیری و کارایی بهینه
ارائه سمپل رایگان این محصول برای محققان عزیز
- ارسال با یخ و حفظ زنجیره سرمایی
- تحویل کالا برای تهران 1 روز کاری برای شهرستان 2-4 روز
199 in stock
1,390,000 تومان – 1,590,000 تومان
ریل تایم PCR، یا qPCR که به عنوان یک روشی کمی از PCR شناخته می شود، در حال حاضر حتی به کاربردی بیشتر از PCR استاندارد رسیده است. این روش قادر است مقدار DNA موجود در یک نمونه را حتی در مقادیری بسیار کم با دقت و حساسیت بالایی کمی سازی کند. البته در حال حاضر با ادغام روش ریل تایم PCR و واکنش رونویسی معکوس که RT نام دارد روشی به نام qRT-PCR ایجاد شده است که می تواند مقدار RNA را نیز کمی سازی کند. qRT-PCR در تحقیقات بیان ژن ها در همه علوم مرتبط با پزشکی، زیست شناسی، کشاورزی، تغذیه و … کاربرد دارد. علاوه بر این در حوزه تشخیص طبی نیز روش qRT-PCR با استفاده از پروب استفاده می شود.
یکی از موارد تعیین کننده در نتایج تکرارپذیر و معتبر در qPCR مسترمیکس استفاده شده از آن است. مستر میکس های بر پایه رنگ غیر اختصاصی از رنگ هایی مانند سایبر گرین و اواگرین و یا متقات این رنگ ها استفاده میکنند. مستر میکس سایبر گرین نوترکیب با نام تجاری RealTiQ در سه نوع بدون رنگ ROX، با مقدار کم ROX و با مقدار زیاد ROX تولید می شود. باید توجه داشت که دستگاه qPCR شما تعیین میکند از کدام نوع مسترمیکس استفاده کنید. آنزیم استفاده شده در RealTiQ یک آنزیم هات استارت بسیار قوی و بدون کوچکترین فعالیت در دمای آماده سازی می باشد. این آنزیم برای شما منحنی های ذوب بسیار خوبی را ایجاد میکند. با این مستر میکس تکثیر غیر اختصاصی به حد اقل رسیده و با کارایی بالایی که در تکثیر دارد، می تواند الگوهای با کپی نامبرهای پایین را نیز برای شما کمی سازی کند.
اطلاعات محصول:
یکی از موارد تعیین کننده در نتایج تکرارپذیر و معتبر در qPCR مسترمیکس استفاده شده از آن است. مستر میکس های بر پایه رنگ غیر اختصاصی از رنگ هایی مانند سایبر گرین و اواگرین و یا متقات این رنگ ها استفاده میکنند. مستر میکس سایبر گرین نوترکیب با نام تجاری RealTiQ در سه نوع بدون رنگ ROX، با مقدار کم ROX و با مقدار زیاد ROX تولید می شود. باید توجه داشت که دستگاه qPCR شما تعیین میکند از کدام نوع مسترمیکس استفاده کنید. آنزیم استفاده شده در RealTiQ یک آنزیم هات استارت بسیار قوی و بدون کوچکترین فعالیت در دمای آماده سازی می باشد. این آنزیم برای شما منحنی های ذوب بسیار خوبی را ایجاد میکند. با این مستر میکس تکثیر غیر اختصاصی به حد اقل رسیده و با کارایی بالایی که در تکثیر دارد، می تواند الگوهای با کپی نامبرهای پایین را نیز برای شما کمی سازی کند.
مستر میکس RealtiQ در غلظت 2x و 5x ارائه می شود که برای استفاده در تمامی دستگاه های ترمال سایکلر qPCR مناسب است.
ویژگی های فنی:
- این مسترمیکس برای 100 واکنش qPCR با حجم 20 میکرولیتر طراحی شده است.
- غلظت مسترمیکس 2x است و در کانال سایبرگرین قابلیت کمی سازی محصول PCR را دارد.
- کاربرد مستر میکس: تست qPCR
- آنزیم: هات استارت و زمان فعال سازی 5 دقیه در دمای 95 درجه سانتی گراد.
- غلظت MgCl2: 1.5 میلی مولار
- رنگ متصل شونده به DNA» سایبرگرین اولتراپیور
- حاوی DNTP اولتراپیور و بافر بهنیه سازی شده.
- رنگ ROX: در 3 نوع با رنگ راکس زیاد، با رنگ راکس کم و بدون رنگ راکس.
شرایط نگهداری:
مسترمیکس را در دمای 20- درجه سانتی گراد نگهداری کنید. برای افزایش ماندگاری، بعد از اولین ذوب مسترمیکس، آن را الیکوت کنید. توجه کنید الیکوت ها حتما دور از نور نگه داری شوند.
روش کار
روش کار با این مسترمیکس مشابه تمامی مسترمیکس های خارجی می باشد.
با استفاده از این مسترمیکس یک مرحله فعال سازی آنزیم خواهید داشت و سپس وارد چرخه های تکثیر می شوید.
با استفاده از این مسترمیکس می توانید qPCR دو مرحله ای یا سه مرحله ای را اتخاذ کنید.
توصیه ما این است که در صورت بهینه بودن پرایمر ها و کوتاه بودن توالی از روش دو مرحله ای استفاده کنید.
نکات مهم قبل از شروع:
1) قبل از استفاده مسترمیکس را ذوب کرده و تکان دهید و سپس اسپین کنید.
2) از آلوده شدن مسترمیکس به پرایمر یا DNA الگو جدا خودداری کنید.
3) دمای بهینه برای انجام پلیمریزاسیون توسط آنزیم استفاده شده در این مسترمیکس 68 درجه سانتی گراد است.
4) از ذوب و انجماد غیر ضروری مسترمیکس خود داری کنید.
مراحل کار:
این مسترمیکس با غلظت 2 برابر تولید شده است لذا با هر حجمی که واکنش PCR انجام می شود باید نصف آن مستر میکس باشد.
برای ساخت واکنش 20 میکرولیتری به ترتیب زیر، مواد را در داخل یک میکروتیوب 0.2 بریزید:
- 10 میکرولیتر مستر میکس سایبرگرین نوترکیب
- 2 میکرولیتر پرایمر 10 پیکومول فوروارد و 2 میکرولیتر پرایمر 10 پیکومول ریورس
- 2 میکرولیتر DNA الگو
- 6 میکرولیتر آب گرید PCR
بعد از ریختن همه موارد ، درب استریپ را بسته و آن ها را اسپین کنید.
برای انجام واکنش با کارایی بالا از برنامه دمایی مناسب برای شرایط واکنش خود استفاده کنید. در زیر یک برنامه عمومی برای کمی سازی نسبی در بررسی بیان ژن ها با طول آمپلیکون 80-150 جفت باز ارائه شده است که می توانید در بسیاری از موارد آن را بکار ببرید:
- دمای فعالسازی: 15 دقیقه در دمای 95 درجه.
- سیکل ها: حداقل 35 سیکل
- دناتوراسیون: 15 ثانیه در دمای 95 درجه.
- انیلینگ: دمای انیلینگپرایمر به مدت 30 ثانیه.
- اکستنشن: دمای 68 درجه سانتی گراد به مدت 20 ثانیه.
نکته 1) طول قطعات خود را بین 80-150 جفت باز انتخاب کنید.
نکته 2) برای یافتن بهترین دمای Annealing برای پرایمر ها یکبار در ابتدای کار از گرادیان دمایی برای ستاپ واکنش خود استفاده کنید. می توانید با ترمال سایلکر PCR استاندارد نیز این کار را انجام دهید. اما توجه کنید که از همین مسترمیکس استفاده شده و مستر میکس دیگری برای بهینه سازی استفاده نشود چرا که می تواند نتایج متفاوتی ایجاد کند.
https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/smll.202309164https://bi.tbzmed.ac.ir/Inpress/bi-30032.pdf
https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/smll.202309164
https://bi.tbzmed.ac.ir/Inpress/bi-30032.pdf
منحنی آنالیز نشده ذوب برای یک ژن در 30 نمونه مختلف تکثیر شده با استفاده از RealTiQ
شرکت نوترکیب آزما تشخیص (NAT Biotech) با مسئولیت محدود به شماره ثبت 616171 تولید کننده تخصصی محصولات بیوتکنولوژی مولکولی آماده ارائه کیت ها، مسترمیکسها، مواد و تجهیزات مورد نیاز تست های مولکولی به تمامی محققین و فعالین دانشگاهی در حوزه های پزشکی، زیست شناسی، ژنتیک، کشاورزی، تغذیه و … می باشد.
بررسی (2)
محمد ساعدی
بهترین نتیجه رو در پروژه به ما داد و در ضمن سمپل رایگان هم به ماکمک کرد اطمینان بیشتری داشته باشیم
سیما اسماعیلزاده
مسترمیکس سایبر گرین RealTiQ که از نوترکیب تهیه کردیم ، خیلی در روند پایانامه ارشد بنده کمک کرد و تونستیم با هزینه کمتر و پشتیبانی بهتر کار رو جلو ببریم
از مجموعه نوترکیب کمال تشکر رو دارم .