کیت استخراج RNA از سلول و بافت | NorexPLUS
استخراج RNA کل از سلول و بافت ها به روش ستونی
این کیت در اندازه 25 و 50 تستی ارائه می شود .
تنها برای مصارف تحقیقاتی (RUO) است.
ارائه سمپل رایگان این محصول برای محققان عزیز
- ارسال با یخ و حفظ زنجیره سرمایی
- تحویل کالا برای تهران 1 روز کاری برای شهرستان 2-4 روز
53 در انبار
تماس بگیرید
کیت نورکس پلاس برای استخراج RNA کل از سلول و بافت ها به روش ستونی کاربرد دارد. این کیت در اندازه 25 و 50 تستی ارائه می شود و تنها برای مصارف تحقیقاتی (RUO) است.
کیت نورکس پلاس برای استخراج RNA کل از سلول و بافت ها به روش ستونی کاربرد دارد. این کیت در اندازه 25 و 50 تستی ارائه می شود و تنها برای مصارف تحقیقاتی (RUO) است.
شرایط نگهداری:
برای استفاده طولانی مدت این کیت در دمای 2-8 درجه سانتی گراد نگهداری می شود.
نکات مهم قبل از شروع:
** از دستکش در کل روند، و از شیلد در هنگام هموژن کردن بافت ها استفاده کنید.
مراحل کار :
1) لیز سلول یا بافت بوسیله بافر NL.
** لیز کردن سلول ها: سلول های سوسپانسیونی حاصل از کشت یا حاصل از مایعات بدنی را قبل از لیز سانتریفیوژ کرده و700 مایکرولیتر از بافر NL را بر روی پلت سلولی بریزید و کاملا با پیپتاژ کردن سلول هارا ریساسپند کنید. برای سلول های چسبنده کشت شده در پلیت ها، بافر NL را میتوانید مستقیما داخل ول های پلیت ریخته و چند بار پیپتاژ کنید.
** لیز کردن نمونه های بافتی: 10-50 میلی گرم بافت تازه یا بافت ذخیره شده را برای استخراج RNA استفاده کنید. اگر بافت ها در محلول محافظت کننده RNA (به عنوان مثال RNAguard از نوترکیب Cat Number: NAT0011) ذخیره شدهاند، قبل از لیز کردن، تمام محلول را از بافت خارج کنید. ابتدا 200 مایکرولیتر بافر NL را بر روی بافت بریزید و بافت را کاملا هموژنایز کنید. بعد از هموژنایز کامل، 500 مایکرولیتر بافر NL را بر روی بافت بریزید و به صورت مختصر پیپتاژ کنید.
2) سلول ها و بافت هموژن شده را به مدت 5 دقیقه در دمای اتاق انکوبه کنید.
3) 200 مایکرولیتر کلروفرم بر روی محلول ریخته و میکروتیوب را به مدت 10 ثانیه به آرامی تکان دهید کرده و 5 دقیقه در دمای اتاق انکوبه کنید.
4) محلول را به مدت 10 دقیقه در دمای 4 درجه سانتی گراد با دور 13000 سانتریفیوژ کنید.
5) محلول رویی (بالاترین فاز که شفاف است) را به آرامی برداشته و در یک میکروتیوب 1.5 سرد شده بر روی کلد رک (یا یخ) بریزید.
6) 250 میکرولیتر الکل 75 درصد سرد بر روی محلول ریخته و به آرامی مخلوط کنید.
7) یک ستون را در داخل کالکشن تیوب گذاشته و محلول را به داخل ستون استخراج بریزید.
8) ستون را به مدت 1دقیقه با دور 12000 سانتریفیوژ کنید.
9) مایع جمع شده در کالشن تیوب را دور ریخته و 750 مایکرولیتر از محلول NW را داخل ستون ریخته و به مدت 1 دققه در دور 12000 سانتریفیوژ کنید.
اختیاری: برای بدست آوردن خلوص بالای RNA، 500 مایکرولیتر از بافر NW را داخل ستون ریخته و مرحله 9 را تکرار کنید.
10) محلول جمع شده در کالکشن تیوب را دور ریخته و بار دیگر ستون خالی را 2 دقیقه در 12000 دور سانتریفیوژ کنید تا محلول NW کاملا از ستون خارح شود.
11) ستون را در یک کالکشن تیوب جدید گذاشته و 50 مایکرولیتر آب DEPC Treated به مرکز سیلیکای ستون بریزید و ستون را 3 دقیقه در دمای اتاق انکوبه کنید.
12) ستون را در 13000 دور به مدت 2 دقیقه سانتریفیوژ کنید. مایع جمع شده در کالکشن تیوب حاوی RNA خالص است که برای غلظت سنجی یا تست های بعدی آماده مصرف است.
شرکت نوترکیب آزما تشخیص (NAT Biotech) با مسئولیت محدود به شماره ثبت 616171 تولید کننده تخصصی محصولات بیوتکنولوژی مولکولی آماده ارائه کیت ها، مسترمیکسها، مواد و تجهیزات مورد نیاز تست های مولکولی به تمامی محققین و فعالین دانشگاهی در حوزه های پزشکی، زیست شناسی، ژنتیک، کشاورزی، تغذیه و … می باشد.
نظرات
هیچ دیدگاهی نوشته نشده است.