کیت استخراج DNA از ژل | Nogex
جهت استخراج قطعات DNA به طول 70 جفت باز تا 10 کیلوباز از ژل آگارز استاندارد
یا ژل آگارز با دمای ذوب پایین که بر پایه ی بافر Tris.acetate/EDTA (TAE) یا بافر(TBE) Tris.borate/EDTA می باشد
تولید شده است و نوع بافر استفاده شده در تهیه ی ژل، تاثیری در کیفیت کیت ندارد.
این کیت قابلیت بازیابی 70 تا 80 درصد از DNA را دارد.
ستون به کاربرده شده در این کیت، از 12 لایه سیلیکا تشکیل شده که باعث افزایش چشمگیری در بازیابی DNA می شود.
کیت استخراج از ژل نوترکیب، در بسته بندی های 10 واکنشی، 25 واکنشی و 50 واکنشی تهیه شده است تا پاسخگوی نیازهای مختلف مصرف کنندگان باشد.
ارائه سمپل رایگان این محصول برای محققان عزیز
- ارسال با یخ و حفظ زنجیره سرمایی
- تحویل کالا برای تهران 1 روز کاری برای شهرستان 2-4 روز
23 در انبار
24,900,000 تومان
23 در انبار
کیت استخراج DNA از ژل | Nogex ، جهت استخراج قطعات DNA به طول 70 جفت باز تا 10 کیلوباز از ژل آگارز استاندارد یا ژل آگارز با دمای ذوب پایین که بر پایه ی بافر Tris.acetate/EDTA (TAE) یا بافر(TBE) Tris.borate/EDTA می باشد، تولید شده است و نوع بافر استفاده شده در تهیه ی ژل، تاثیری در کیفیت کیت ندارد.
این کیت قابلیت بازیابی 70 تا 80 درصد از DNA را دارد. ستون به کاربرده شده در این کیت، از 12 لایه سیلیکا تشکیل شده که باعث افزایش چشمگیری در بازیابی DNA می شود.
کیت استخراج از ژل نوترکیب، در بسته بندی های 10 واکنشی، 25 واکنشی و 50 واکنشی تهیه شده است تا پاسخگوی نیازهای مختلف مصرف کنندگان باشد.
محتویات ارائه شده در کیت استخراج DNA از ژل | Nogex :
- بافر NB-G
- بافر NB-PE
- بافر NB-EB
- ستون تخلیص و کالکشن تیوب
* موادی که در این کیت ارائه نشده است ولی مورد نیاز می باشد:
الکل 96-100%، ایزوپروپانول، سدیم استات 3 مولار با pH=5 و میکروتیوب 1.5.
* شرایط نگهداری
می توان حداکثر تا 12 ماه، این کیت را در دمای اتاق (15 تا 25 درجه سانتی گراد) نگهداری کرد. برای نگهداری طولانی مدت می توانید کیت را در دمای 2 تا 8 درجه سانتی گراد نگهداری کنید. اگر بعد از نگهداری در دمای 2 تا 8 درجه سانتی گراد، هرگونه رسوبی در کف بطری ها دیده شد، این نشان از افت کیفیت یا خراب بودن محصول نیست، تنها کافی است قبل از استفاده، بافرها را تا دمای 37 درجه سانتی گراد گرم کنید.
نکات مهم قبل از شروع
- رنگ زرد بافر NB-G نشاندهنده ی pH≤7 می باشد.
- قبل از استفاده، به بافر NB-PEاتانول (100-96%) اضافه کنید. ( با توجه به حجم ذکر شده بر روی برچسب بطری)
- تمامی مراحل سانتریفیوژ ، با دور(17900 x g) 13000 rpm انجام می شود.
* مراحل کار
- قطعه DNA مورد نظر را توسط یک تیغ تیز و تمیز از ژل آگارز برش دهید. با حذف ژل اضافه، اندازه ی برش ژل را به حداقل برسانید. این کار را حتما بکنید، هرچه مقدار ژل آگارز بیشتر باشد باعث ایجاد آلودگی خواهد شد.
- برش ژل را در یک میکروتیوب بی رنگ وزن کنید و سه برابر وزن ژل، از بافر NB-G به آن اضافه کنید. ( 100 میلی گرم یا تقریبا 100 میکرولیتر)
به عنوان مثال، به ازای هر 100 میلی گرم از ژل، 300 میکرولیتر از بافر NB-G بریزید. اگر درصد آگارز ژل بیشتر از 2 درصد باشد، 6 برابر حجم ژل از بافر NB-G اضافه کنید. اگر وزن ژل بیشتر از 300 میلی گرم بود، بیشتر از یک ستون استفاده کنید.
- میکروتیوب را به مدت 10 دقیقه یا تا زمانی که ژل کاملا حل شود در دمای 50 درجه ی سانتی گراد انکوبه کنید. برای کمک به بهتر حل شدن ژل، هر 3-2 دقیقه یکبار، میکروتیوب را ورتکس کنید.
نکته (ژل آگارز باید کاملا حل شود. اگر درصد آگارز ژل، دو درصد یا بیشتر باشد، زمان انکوباسیون را بیشتر کنید.
- بعد از اینکه برش ژل کاملا حل شد، رنگ مخلوط را چک کنید که آیا مشابه رنگ زرد بافر NB-G ( قبل از حل شدن ژل آگارز) هست یا خیر.
اگر رنگ مخلوط متمایل به نارنجی یا بنفش شده بود، حتما 10 میکرولیتر سدیم استات 3 مولار، با pH=5 به آن اضافه کنید و کاملا مخلوط کنید. بعد از اینکار رنگ محلول زرد خواهد شد.
نکته) اتصال DNA به ستون فقط زمانی کارامد است که بافر زردرنگ است.
- هم حجم ژل، به نمونه ایزوپروپانول اضافه و کاملا مخلوط کنید. به عنوان مثال اگر وزن برش ژل 100 میلی گرم بود، به آن 100 میکرولیتر ایزوپروپانول اضافه کنید.
- ستون را در یک کالکشن تیوب قرار دهید. نمونه را در ستون بریزید و به مدت یک دقیقه سانتریفیوژ کنید. مایع جمع شده در کالکشن تیوب را دور بریزید و دوباره ستون را درون آن قرار دهید.
- 250 میکرولیتر از بافر NB-G را درون ستون بریزید و به مدت 5 دقیقه منتظر بمانید و سپس ستون را سانتریفیوژ کنید. محلول جمع شده را دور ریخته و ستون را دوباره در کالکشن تیوب قرار دهید.
- 750 میکرولیتر از بافر NB-PE را درون ستون بریزید و 3 دقیقه منتظر بمانید. ستون را به مدت یک دقیقه سانتریفیوژ کنید. مایع جمع شده در کالکشن تیوب را دور بریزید.
- مرحله 8 را مجددا تکرار کنید.
- مایع جمع شده در کالکشن تیوب را دور بریزید و ستون و کالکشن تیوب خالی را یکبار دیگر به مدت 2 دقیقه سانتریفیوژ کنید.
نکته مهم) باقیمانده ی بافر NB-PE تنها در صورتی به طور کامل حذف می شود که قبل از این مرحله، محلول جمع شده در تیوب جمع آوری کاملا خالی شود.
- ستون را درون یک میکروتیوب تمیز به حجم 1.5 میلی لیتر قرار دهید. 50 میکرولیتر از بافر NB-EB را درست در مرکز سیلیکای ستون بریزید و 5-3 دقیقه منتظر مانده و سپس به مدت یک دقیقه سانتریفیوژ کنید.
نکته مهم) بافر NB-EB را درست در مرکز سیلیکای ستون بریزید. میانگین حجم شسته شده، 48 میکرولیتر از 50 میکرولیتر و 28 میکرولیتر از 30 میکرولیتر می باشد.
12. محلول جمع آوری شده حاوی DNA تخلیص شده از ژل آگارز است. می توانید آن را برای تست های بعدی مستقیما استفاده کنید یا در دمای منفی 20 درجه سانتی گراد به مدت نامحدود نگهداری کنید.
شرکت نوترکیب آزما تشخیص (NAT Biotech) با مسئولیت محدود به شماره ثبت 616171 تولید کننده تخصصی محصولات بیوتکنولوژی مولکولی آماده ارائه کیت ها، مسترمیکسها، مواد و تجهیزات مورد نیاز تست های مولکولی به تمامی محققین و فعالین دانشگاهی در حوزه های پزشکی، زیست شناسی، ژنتیک، کشاورزی، تغذیه و … می باشد.
نظرات
هیچ دیدگاهی نوشته نشده است.