کیت سنتز Notescript | cDNA
در اندازه های 25، 50 و 100 واکنشی ارائه می شود
تنها برای مصارف تحقیقاتی (RUO)
ارائه سمپل رایگان این محصول برای محققان عزیز
- ارسال با یخ و حفظ زنجیره سرمایی
- تحویل کالا برای تهران 1 روز کاری برای شهرستان 2-4 روز
132 در انبار
1,215,000 تومان–2,190,000 تومان
کیت سنتز cDNA نوترکیب برای سنتز cDNA از روی الگوی RNA کل استفاده می شود. این کیت در اندازه های 25، 50 و 100 واکنشی ارائه می شود و تنها برای مصارف تحقیقاتی (RUO) است.
شرایط نگهداری
تمامی مواد این کیت در دمای 20- درجه سانتی گراد نگهداری شود.
کیت سنتز cDNA نوترکیب برای سنتز cDNA از روی الگوی RNA کل استفاده می شود. این کیت در اندازه های 25، 50 و 100 واکنشی ارائه می شود و تنها برای مصارف تحقیقاتی (RUO) است.
شرایط نگهداری
تمامی مواد این کیت در دمای 20- درجه سانتی گراد نگهداری شود.
نکات مهم قبل از شروع:
** مرحله آماده سازی مواد واکنش را در زیر وورک استیشن بعد از پرتو دهی با UV انجام دهید.
** از RNA باکیفیت و کمیت مناسب استفاده کنید: این کیت برای تبدیل 5 پیکوگرم تا 5 مایکروگرم RNA کل به cDNA کاربرد دارد. کیفیت RNA استخراجی در کیفیت سنتز cDNA نقش مهمی دارد لذا از RNA خالص و بدون آلودگی گوانیدین، فنول یا DNA استفاده کنید. اصولا کمیت RNA در بسیاری از موارد تحت تاثیر آلودگی اشتباه محاسبه می شود.
کیت استخراج RNA ستونی NorexPLUS (Cat Number: NAT006) می تواند RNA بسیار خالص و با اینتگریتی بالا و بدون آلودگی در اختیار شما قرار دهد.
** از کلد رک استفاده کنید و همه آماده سازی ها را در دمای 4 درجه سانتی گراد انجام دهید.
** اگر تعداد نمونه ها بیشتر از 4 عدد است. توصیه می شود ابتدا یک مستر میکس از بافر و آنزیم بسازید و بعد از مخلوط کردن کامل آن، در داخل میکروتیوب ها الیکوت کنید.
** اگر cDNA سنتز شده برای کارهای دقیقی مانند اعتبار سنجی ژن کنترل داخلی استفاده خواهد شد، توصیه می شود حتما با محاسبه دقیق غلظت RNA، برای سنتز cDNA در نمونه های مختلف، از مقادیر یکسانی RNA از نظر وزنی استفاده شود (به عنوان مثال 2 مایکروگرم).
نکات مهم قبل از شروع:
** مرحله آماده سازی مواد واکنش را در زیر وورک استیشن بعد از پرتو دهی با UV انجام دهید.
** از RNA باکیفیت و کمیت مناسب استفاده کنید: این کیت برای تبدیل 5 پیکوگرم تا 5 مایکروگرم RNA کل به cDNA کاربرد دارد. کیفیت RNA استخراجی در کیفیت سنتز cDNA نقش مهمی دارد لذا از RNA خالص و بدون آلودگی گوانیدین، فنول یا DNA استفاده کنید. اصولا کمیت RNA در بسیاری از موارد تحت تاثیر آلودگی اشتباه محاسبه می شود.
کیت استخراج RNA ستونی NorexPLUS (Cat Number: NAT006) می تواند RNA بسیار خالص و با اینتگریتی بالا و بدون آلودگی در اختیار شما قرار دهد.
** از کلد رک استفاده کنید و همه آماده سازی ها را در دمای 4 درجه سانتی گراد انجام دهید.
** اگر تعداد نمونه ها بیشتر از 4 عدد است. توصیه می شود ابتدا یک مستر میکس از بافر و آنزیم بسازید و بعد از مخلوط کردن کامل آن، در داخل میکروتیوب ها الیکوت کنید.
** اگر cDNA سنتز شده برای کارهای دقیقی مانند اعتبار سنجی ژن کنترل داخلی استفاده خواهد شد، توصیه می شود حتما با محاسبه دقیق غلظت RNA، برای سنتز cDNA در نمونه های مختلف، از مقادیر یکسانی RNA از نظر وزنی استفاده شود (به عنوان مثال 2 مایکروگرم).
مراحل کار:
مرحله 1) آماده سازی واکنش :به تعداد نمونه RNA خود، میکروتیوب های 0.2 استریل و RNase free را بر روی کلد رک قرار دهید. سپس بافر آنزیم را در دمای اتاق ذوب کرده و اگر رسوبی در آن مشاهده کردید با ورتکس کردن آنرا حل کنید.
مقادیر زیر از مواد کیت و RNA را از هر نمونه طبق غلظتشان در داخل میکروتیوب 0.2 بریزید.
Pure RNA (5pg-5ug)
PDB (2x) 10ul
RT Enzyme 1ul
DEPC treated water to 20ul
مرحله 2) برنامه دمایی: بعد از مخلوط کردن مواد ذکر شده در بالا درب میکروتیوب هارا بسته و آن ها را طبق برنامه دمایی زیر در بلوک یک ترمال سایکلر قرار دهید و دستگاه را روشن کنید.
25֯ C 10 min
55 ֯ C 20 min
85֯ C 5 min
بعد از اتمام برنامه دمایی، cDNAهارا در دمای 20- ذخیره کنید و یا مستقیما جهت انجام PCR و یا qPCR مورد استفاده قرار دهید.
برای انجام PCR و qPCR از مستر میکس Redimix (Cat Number: NAT001) و RealTiQ (Cat Number: NAT007) نوترکیب می توانید استفاده کنید.
شرکت نوترکیب آزما تشخیص (NAT Biotech) با مسئولیت محدود به شماره ثبت 616171 تولید کننده تخصصی محصولات بیوتکنولوژی مولکولی آماده ارائه کیت ها، مسترمیکسها، مواد و تجهیزات مورد نیاز تست های مولکولی به تمامی محققین و فعالین دانشگاهی در حوزه های پزشکی، زیست شناسی، ژنتیک، کشاورزی، تغذیه و … می باشد.
نظرات
هیچ دیدگاهی نوشته نشده است.